2005年，在《有招出招》中表演口技，模仿二胡、青蛙、吸塵機、蕭亮、鍾景輝等十多種聲音而獲導演葉念琛邀請演出電影《獨家試愛》。2006年，被調到戲劇組，爲郭晉安於劇集《東方之珠》凌風一角作幕後代唱。2007年，在時裝處境劇《同事三分親》中飾樓華揚名。2008年TVB臺慶晚會中，與阮兆祥、李思捷組成“扮演天王福祿壽”。在電影《保持通話》中扮演手機售貨員。2008年，經無線傾洽加盟英皇娛樂Music Plus爲旗下合約歌手，併成爲香港小姐競選的司儀。同年，在時裝處境劇《畢打自己人》中飾鄧勵軍，並獲得飛躍進步男藝員獎項。2009年，成爲第28屆香港電影金像獎的司儀之一，並擔任林峯紅館演唱會的嘉賓。同年，爲王祖藍度身打造的喜劇電影《矮仔多情》，成爲他第一部作爲男一號出演的電影。
2010年，王祖藍主演了電影《72家租客》和電視劇《情人眼裏高一D》。3月27日開始，擔任香港TVB扮演綜藝《荃加福祿壽》其中一位主持“祿”。7月30日至31日在香港伊麗莎伯體育館舉行一連三場《咪咁扮嘢》王祖藍演唱會。同年，王祖藍參與主演的《人間喜劇》和《翡翠明珠》先後在香港和大陸上映。2012年8月開機的《葉問-終極一戰》中飾演盲公陳。11月29日，在《百變大咖秀》扮演葫蘆娃。12月7日上映的《我的老公不靠譜》飾演李先生，即是毒舌藍。12月27日，在《百變大咖秀》扮演哥哥張國榮。2013年1月17日，在《百變大咖秀》中模仿吉祥三寶，演繹《吉祥三寶》。1月31日，在《百變大咖秀》中模仿龔麗娜的《法海不懂愛》。2月14日，在《百變大咖秀》與女友一起上臺演繹，互相表白。2月在《食爲奴》飾演高天寶，透過飲食幫助雍正成就大業，與雍正有兄弟之誼。鍾情年若碧，後與米小魚成親。2014年，王祖藍加盟綜藝節目《奔跑吧兄弟》並主演了電影版。
雖然王祖藍已經有相當的知名度了，但他依舊是個很謙虛的人，經常聽到有喜劇界的前輩誇讚他。就連祖藍自己也說，常聽到別人說他可以接班志偉哥、接班星爺，搞到他自己壓力好大。可能也正是因爲這樣，祖藍從不覺得自己紅。其實和那些巨星相比，他更願意做一個陪伴觀衆成長帶給觀衆歡笑的人。除了坦言自己有壓力之外，祖藍一點不介意地拿自己的身高來自嘲，他說自己矮，而且不帥，做明星的很少有幾個會像他這樣清醒，不犯“王子病”就已經不錯了。
