艾滋病可以通過檢測艾滋病病毒（HIV）的抗體、抗原、核酸或病毒培養來確定。目前，標準的檢測方法是做HIV抗體檢測，它是診斷HIV感染者和艾滋病的主要指標和標準檢測項目。
由於HIV感染和艾滋病的診斷必須準確、可靠，故HIV抗體的檢測需採用標準的血清學試驗。受檢者要到國家批准的艾滋病初篩實驗室（一般在各省市衛生防疫站、疾病控制中心、皮膚性病防治所（院）、大的綜合醫院）先作初篩試驗，陽性者再用兩種試劑作重複檢測，也就是複檢（陰性者不做）。若複檢一種或兩種試劑均爲陽性，再將標本送到國家批准的艾滋病確認實驗室（見附錄）做確認試驗。經過以上初篩試驗（包括初檢和複檢）及確認試驗，結果HIV抗體陽性方可發出報告，再結合流行病學史、高危行爲史等才能最終確定診斷。也就是說艾滋病的實驗室檢查一般是初篩試驗1～2次，確認試驗1次。但有的人初篩2次均爲陽性，確認試驗結果爲“不確定”，這樣的人一般要求3個月後複查。複查時如確認試驗仍爲“不確定”，要過3個月後再複查，結果仍爲“不確定”或陰性，則可排除其爲HIV感染者。
