應用胰島素原則上應該從小劑量開始，如每日總量0.2單位/千克體重。根據用藥後血糖的反應，逐步增加或減少劑量，一般每次增減2~4單位，直至血糖達標。
正常成人每天分泌的基礎胰島素量爲18~32單位，另外還有因進餐等刺激引起的分泌量，理論上說每天總共40~60單位，這已經夠用了。
不過，事實沒有那麼簡單，尤其是2型糖尿病患者往往存在胰島素抵抗，也就是說機體對胰島素的作用不敏感，尤其是到了疾病的後期，胰島素的需要量可能大於以上數字，具體數值因患者胰島素抵抗的程度不同而異。此外，還有些特殊情況。有些患者因之前用過動物胰島素，由於動物胰島素的化學結構與人胰島素不同，或者含有某些雜質，使體內產生了抗體。注射的胰島素優先與這些抗體結合，而不能與胰島素受體結合，而無法發揮作用。因此想控制血糖就得加大胰島素的劑量。還有一些先天性罕見的胰島素抵抗疾病或綜合徵，劑量也要用得很大。這些情況下，每天用幾百單位甚至上千單位都有可能。
值得強調的是，“沒有上限”的前提是不發生低血糖，因爲胰島素過量發生低血糖的後果是十分嚴重的，要遠遠超過血糖稍高所造成的損害。
常用的胰島素濃度
發達國家生產的胰島素濃度有兩種，一種是常用的100單位/毫升（U-100），另一種是500單位/毫升（U-500）。後一種就是專門爲那些特殊的胰島素抵抗患者所用的。我國生產的胰島素，由於以前生產的是動物胰島素，濃度只有40單位/毫升（U-40），一直沿用至今。現在一些外資藥企爲了適應中國國情，生產的人胰島素也用了40單位/毫升的濃度。但是胰島素注射筆用的特製筆芯，因爲不必另用注射器，而是由筆調節劑量的，則爲100單位/毫升（U-100）。
